Los oligonucleótidos antisentido para el REa inhiben la proliferación celular inducida por progestágenos. En cultivos primarios de CC4-HD , el MPA estimula la proliferación celular (Dran et al, 1995; Fig 1) mientras que el ICI 182.780 la inhibe (Lamb et al, 2003, Fig. IB y D). El asRE inhibe la incorporación de timidina-3H, en concentraciones superiores a 0.6-ug/ml (Fig. 1 A) y el crecimiento celular a 5 jug/ml (Fig. 1C). Oligonucleótidos scrambled (scRE) inducen efectos inhibitorios a concentraciones mayores a 5 -ug/ml. Los fibroblastos estromales no fueron inhibidos bajo las mismas condiciones experimentales {inserto Fig. 1A y IB). Se observó una inhibición en el binding del RE en las células tratadas con el asRE (Fig. 2A). La expresión de RP en células taradas con asRE. Para estudiar la expresión del RP por binding, se utilizaron células incudabas con 5 -ug/ml de asRE o scRE por 24hs. Como se puede ver en la Fig. 2B, el tratamiento de las células con asRE inhibe el binding al RP. Esta inhibición no fue completa, sugieriendo que aunque el RP esta regulado por el RE, puede ocurrir una expresión constitutiva del RP. Ensayos de co-inmunoprecípitación. Los extractos inmunoprecipitados con anticuerpos anti RP son inmunoreactivos con RE (Fig. 3A). Asi como los extractos inmunoprecipitados con anticuerpos anti RE muestran inmunoreactividad con ambas isoformas (A y B) del RP cuando se utilizan distintos anticuerpos (Abl y Ab7+Ab5, Fig. 3B y 3C), confirmando nuestras anteriores observaciones. Ambas isoformas del receptor de progesterona, son selectivamente reconocidas por diferentes anticuerpos (isoforma B con Abl, e isoforma A con Ab7+Ab5). Estos resultados indican que el REa es capaz de interactuar con ambas isoformas de RP. Inmunofluorescencia para RE y RP. La doble marcación para los RE (MC20) y RP (Ab7) revela que existe una co-localización nuclear de ambos receptores (Fig. 4 y 5). No hemos observado con estas técnicas marcación de receptores en la membrana. Or