Detección de transcriptos de fusión como marcadores de micrometástasis y de enfermedad residual mínima en tumores de la familia Ewing

    Año de publicación: 2007

    La familia de tumores de Ewing (TFE) es el segundo tumor óseo maligno más común en niños y adolescentes. Más del 90 por ciento de los TFE presentan la traslocación t(11;22)(q24;q12) (proteína de fusión EWS-FLI), su identificación es un marcador de TFE. Esta puede detectarse por retrotranscripción seguida de PCR con los iniciadores EWS-F/FLI1C. Además, con otro par de iniciadores (EWS/WT1) se realiza el diagnóstico diferencial entre TFE y sarcoma desmoplásico. La presencia de enfermedad en médula ósea al momento del diagnóstico es un indicador de peor pronóstico. Algunos pacientes con enfermedad aparentemente localizada, desarrollan metástasis, lo que sugiere que la histología resulta insuficiente para detectar estas micrometástasis. Nos propusimos realizar la búsqueda de estos transcriptos en muestras de tumor al diagnóstico, y en muestras de médula ósea y sangre periférica al diagnóstico, durante el tratamiento y tras finalizar el mismo para evaluar su valor predictivo como marcador de recurrencia. Se llevó a cabo la puesta a punto de la metodología de detección de los transcriptos. Si bien se probaron dos estrategias de PCR previamente descriptas, los mejores resultados se obtuvieron mediante una PCR heminested, diseñada en el presente trabajo combinando las estrategias anteriormente mencionadas, por su mayor sensibilidad. Todas las muestras analizadas de médula ósea, biopsias y 1 de 5 de las de sangre periférica tomadas en el momento del diagnostico fueron positivas para el transcripto de fusión estudiado. El fragmento amplificado fue específico para la translocación, como lo pudimos comprobar a través de la secuenciación.

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