INTRODUCCIÓN Coqueluche es una enfermedad respiratoria aguda que presenta 16 millones de casos anuales, aunque la vacunación masiva los ha reducido considerablemente. La alta comunicabilidad de la enfermedad marca la necesidad de realizar una detección temprana del caso índice y los contactos cercanos. OBJETIVOS Realizar la puesta a punto de una nueva metodología de ELISA, que emplea como antígeno a la subunidad S1 y requiere un único suero. MÉTODOS Se analizaron sueros de título conocido, titulados mediante la metodología de ELISA a células enteras de Bordetella pertussis, especialmente de adolescentes y adultos que habían recibido la última dosis de vacuna anti-pertussis más de tres años antes. Además, se escaló la obtención de la subunidad S1 de la toxina pertussis PTXS1. RESULTADOS La mejor condición de ensayo fue sensibilizando la placa de ELISA con 10 µg/ ml de PTXS1, tres horas de bloqueo, dilución de 1/1500 del anticuerpo secundario y 150 µl del sustrato de la enzima con 50 µl de solución stop para revelar la reacción. En esas condiciones se obtuvieron, para los sueros con títulos de ELISA considerados como positivos por la metodología de ELISA a células enteras (10), títulos de 1/320, mientras que para los sueros considerados como negativos (10), los títulos obtenidos a partir del ensayo de ELISA utilizando PTXS1 recombinante purificada fueron de 1/20-1/40. El rendimiento promedio obtenido con las purificaciones automatizadas fue tres veces mayor que con purificación manual. DISCUSIÓN El desarrollo de un test de ELISA que emplee la subunidad S1 de la toxina pertussis PTXS1, obtenida de forma recombinante a nivel local, y que pueda ser validado contra otros ensayos de ELISA disponibles, redundaría en una herramienta útil para el diagnóstico de la enfermedad en la población adolescente y adulta.