La Leishmaniasis es una enfermedad parasitaria desatendida causada por hemoflagelados del género Leishmania y transmitida a humanos por la picadura de dípteros de la sub-familia Phlebotomies. Dependiendo de la especie de Leishmania, la enfermedad presenta diferentes formas clínicas incluyendo manifestaciones cutáneas, mucocutáneas y viscerales. En América Latina, la Leishmaniasis Tegumentaria Americana que engloba las formas cutánea y mucocutánea, es endémica desde la península de Yucatán hasta el norte de Argentina, incluida la provincia de Tucumán. El presente estudio tuvo como objetivo realizar el estudio retrospectivo de pacientes con sospecha clínica de Leishmaniasis Tegumentaria (LT) derivados al Departamento Bioquímico-Laboratorio de Salud Pública de San Miguel de Tucumán, durante abril de 2015 a marzo de 2017. Un total de 30 muestras de frotis de lesión y/o biopsia de 23 pacientes fue analizado por microscopía óptica (M.O.) y PCR. Las muestras en las que se detectó banda específica de Leishmania spp. por amplificación de ADN kinetoplastídico (ADNk) fueron sometidas a PCR Específica de Polimorfismo (PS-PCR) para la investigación de subgénero y especie. Además se procedió al análisis de la secuencia del gen de citocromo b para la confirmación de especie. Se diagnosticaron 4 pacientes con LT por M.O. (17,4%). La amplificación del ADNk resultó positiva en 8 pacientes (34,8%). La combinación de M.O. y amplificación del ADNk a partir de muestras de frotis de lesión y tejido de biopsia mejoró notablemente el diagnóstico de LT. Con respecto a los sub-géneros identificados, se detectó que el mismo fue Viannia y las especies asociadas correspondieron a braziliensis